各种pcr概述汇总如下:
1、常规pcr:
直接pcr是指直接从样品扩增目标dna,无需进行核酸分离纯化。
2、热启动pcr:
热启动pcr常用于增强pcr扩增的特异性。该方法主要利用抗体、亲合配体、适体或化学修饰物等酶修饰酶,来抑制室温下的dna聚合酶的活性。这种修饰使得在pcr体系配制阶段引物与模板、引物与引物之前的结合能力降低,从而避免了非特异性扩增。
3、巢式pcr:
巢式pcr是标准pcr的一种演变,其增强了反应特异性和目标扩增子的产量。
4、快速pcr:
在快速pcr中,通过缩减pcr步骤所需时间来完成更快的扩增,且不会影响扩增产量和效率。快速循环条件尤其适用于具有高扩增能力的dna聚合酶,这类聚合酶在每个结合中可引入更多的核苷酸。
5、高gc含量pcr:
具有高gc含量(>65%)的dna模板由于g和c碱基间的强氢键影响,比较难以扩增。富含gc的序列同时也涉及二级结构。因此,富含gc的序列可导致dna聚合酶沿模板扩增时“卡顿”并干扰dna合成。
6、多重 pcr:
多重pcr可在同一pcr反应管中同时扩增多个不同的片段。多种pcr不仅意味着节省时间、试剂和样品,还能够同时对比多个扩增子
7、长片段 pcr:
长片段pcr通常是指扩增大于5kb的dna片段。长片段pcr传统上使用 taq dna 聚合酶(用于快速延伸)和高保真酶(用于提高准确性)的混合物。
8、定量pcr:
序列的扩增程度(得率)取决于模板起始量,pcr常用于对样品中的dna进行定量,其中,最常见的应用是基因表达定量。
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