高效液相色谱法测定辣椒素类物质
摘要：辣椒素((反式) 8-甲基-n-香草基-6-壬烯酰胺)是辣椒的活性成分。辣椒素和与其相关一些的化合物并称为辣椒元，它们是辣椒产生的次级代谢产物。
1.范围：
用高效液相色谱法测定辣椒及辣椒制品中辣椒素类物质的方法及辣度表示方法。
本方法的检出限：辣椒素、二氢辣椒素均为1mg/kg，线性范围为1mg/l-150mg/l。
2.仪器
液相色谱仪、色谱柱、柱温箱、*、过滤器、滤膜、氮吹仪、液相进样针3.试样提取：在样品中加入甲醇—四氢呋喃混合溶剂25ml，用保鲜膜封口，用针扎几个小孔，然后在60℃浴条件下，使用*提取30min。用滤纸过滤，收集滤液，然后将滤渣连同滤纸重新加甲醇—四氢呋喃混合溶剂25ml，使用*提取10min，重复两次，将三次过滤收集的滤液合并，用氮吹仪在70℃温度下浓缩至10ml-20ml，然后用甲醇—四氢呋喃混合溶剂定容至50ml，经过滤器(0.45µm微孔过滤膜)过滤后进行色谱分析。根据样品中辣椒素类物质总量和检测器的灵敏度，必要时可以适当调整稀释倍数。
4.色谱参考条件：
色谱柱：kromasil c-18 (4.6mm*250mm 5um)
流动相：甲醇：水=65：35
进样量：10 µl
流速：1.0 ml/min
紫外检测波长：280nm
柱温箱温度：30℃
5.结果：
按照色谱条件，进行hplc分析，用标准物质色谱峰的保留时间定性；根据辣椒素、二氢辣椒素标准曲线及试样中的峰面积定量。
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