HEPES缓冲对作为mRNA原液buffer的原因
2016年biontech发表lpx-mrna制剂的文章中mrna原液中所采用的buffer为hepes。该研究中使用hepes缓冲液配置1mg/ml的rna原液，用于进一步制备rna-lpx。
hepes作为ivt反应体系buffer具有优势，这是我们结合相关文献，推断biontech采用hepes缓冲对作为mrna原液buffer的原因。
三、hepes相较于其他缓冲体系较为突出的特点
1、pka随温度变化非常小，buffer的ph值随温度漂移很小。
2、性质稳定，hepes不会与其他离子发生相互作用，一方面hepes不会与其他离子发生络合影响其他离子功能，另外一方面其他离子的存在不会影响hepes的缓冲能力。
3、细胞培养基中ph的维持主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的co2共同维持，当细胞处于开放环境时，co2逸散会导致ph快速上升脱离生理ph范围，而添加hepes缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
4、hepes不易穿过生物膜，不干扰细胞内的生化反应。
四、使用hepes缓冲体系时的注意事项
1、由于pai嗪基团的存在，当hepes暴露于光线中时，会产生h2o2，这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性，同时对氧化还原敏感的物质不宜共同使用，因此hepes作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。
2、hepes在生化领域常见的使用浓度为10-25mm，当浓度低于10mm时缓冲能力较弱，不能起到较好的缓冲效果，当浓度较高时对一些细胞可能具有毒害作用。
艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、tris/tris-hcl、hepes等生物保护剂与缓冲盐，gmp条件生产，中美双报，供注射用，超低内毒素，dnase& rnase free，符合国际主流药典标准，助力重组蛋白疫苗、mrna疫苗、腺病毒载体疫苗、脂质体、单双抗、抗体偶联药物等生物制剂生产与中外申报！
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3、细胞培养基中ph的维持主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的co2共同维持，当细胞处于开放环境时，co2逸散会导致ph快速上升脱离生理ph范围，而添加hepes缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
4、hepes不易穿过生物膜，不干扰细胞内的生化反应。
四、使用hepes缓冲体系时的注意事项
1、由于pai嗪基团的存在，当hepes暴露于光线中时，会产生h2o2，这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性，同时对氧化还原敏感的物质不宜共同使用，因此hepes作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。
2、hepes在生化领域常见的使用浓度为10-25mm，当浓度低于10mm时缓冲能力较弱，不能起到较好的缓冲效果，当浓度较高时对一些细胞可能具有毒害作用。
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