当实验中途停止或结束时,实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物,原则上不给实验动物任何和痛苦,也就是要施行。是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下。实验动物方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。
一、蛙类
常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住,露出头部,左手执蛙,并用食指按压其头部前端,拇指按压背部,使头前俯;右手持探针由凹陷处垂直刺入,刺破皮肤即入枕骨大孔。这时将探针转向头方,向前深入颅腔,然后向各方搅动,以捣毁脑组织。再把探针由枕骨大孔刺入并转向尾方,刺入椎管,以破坏脊髓。脑和脊髓是否破坏,可检查动物四肢肌肉的紧张性是否消失。拔出探针后,用一小干棉球将针孔堵住,以防止出血。操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验者眼内。如被射入时,则需立即用生理盐水冲洗眼睛。
二、大鼠和小鼠
1. 颈椎脱臼法:右手抓住鼠尾用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头。将脊髓与脑髓拉断,鼠便立即死亡。
2. 断头法:用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉,鼠立即死亡。
3. 击打法:右手抓住鼠尾,提起,用力摔击其头部,鼠痉挛后立即。或用木锤用力击打鼠头部也可致死。
4. 急性大出血法:可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使鼠立即死亡。
5. 药物致死法:吸入一定量的一氧化碳、、氯仿等均可使动物致死。
三、狗、兔、豚鼠
1. 空气栓塞法:向动物静脉内注入一定量的空气,使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后,可在右心随着心脏的跳动使空气与血液成泡沫状,随血液循环到全身。如进到肺动脉,可阻塞其分支,进入心脏冠状动脉,造成冠状动脉阻塞,发生严重的血液循环障碍,动物很快致死。一般兔、猫等静脉内注入20~40ml空气即可致死。每条狗由前肢或后肢皮下静脉注入80~150ml空气,可很快致死。
2. 急性失血法:先使动物轻度麻醉,如狗可按每公斤体重静脉注射硫喷妥钠20~30mg,动物即很快入睡。暴露股三角区,用锋利的杀狗刀在股三角区作一个约10厘米的横切口,把股动、静脉全切断,立即喷出血液。用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块,同时不断的用自来水冲洗流血,使股动脉切口保持畅通,动物在3~5分钟内即可致死。采用此种方法,动物十分安静,对脏器无损伤,对活杀采集病理切片标本是一种较好的方法。
如果处死狗的同时要采集其血液时,则在用硫喷妥钠轻度麻醉后,将狗固定在狗上。分离颈动脉,插一根较粗的塑料管,放低狗头,打开,使动脉血流入装有抗凝血的容器内,并不断摇晃,以防血液凝固。
二氧化碳麻醉箱是通过直接或间接的缺氧引起动物死亡的,它可以在各种场所使用,并可以不同的速度使动物失去意识。要想达到苦、无疼痛的死亡,就要在动作(肌肉活动)消失之前丧失意识。但是动作消失并不等同于丧失意识和没有痛苦。因此,只能引起肌肉麻痹而不能使动物丧失意识的药物不能作为单独的药物。二氧化碳法可能使动物在丧失意识之后产生运动活动,但这些运动活动只是反射活动,不能被动物感知。因此可以独立的作为方法。
传统的断头、放血等动物致死方式,方法比较残忍,容易对实验人员的心理产生负面影响;麻醉致死的方法更不可能,本身易燃易爆并且有很强的致癌性,对实验人员伤害更大。二氧化碳安全性高,也能有效减少实验动物的疼痛和痛苦。
该系统体积小巧,占地空间小,可有效减少二氧化碳的使用,易学易用,操作简单。
二氧化碳麻醉方式更符合动物福利。
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